Survey of heat stress response of Enterococcus faecium using fluorimetry and flow cytometry

Iris Altenburger

Title (eng)

Parallel title (deu)

Untersuchung der Hitzestressreaktion von Enterococcus faecium mittels Fluorimetrie und Flowzytometrie

Author

Iris Altenburger

Advisor

Helmut Viernstein

Assessor

Helmut Viernstein

Abstract (deu)

Die Effekte auf die Vermehrungsfähigkeit von Enterococcus faecium M-74 wurden bei fünf verschiedenen Temperaturen beobachtet. Die Ergebnisse zeigten, dass die Anzahl der lebensfähigen Bakterien umso stärker sank, je höher die Temperatur war, der sie ausgesetzt worden waren. Unter der Annahme, dass unterschiedliche Veränderungen bzw. Reaktionen in Bakterien statt finden, sobald sie mit hohen Temperaturen konfrontiert werden, wurde Enterococcus faecium M-74 unter Verwendung verschiedener Fluoreszenzfarbstoffe mittels Fluorimetrie und Flowzytometrie untersucht. Aufgrund der unterschiedlichen Eigenschaften der Fluoreszenzfarbstoffe konnten mehrere lebenswichtige Funktionen der Bakterien unter Hitzestress beobachtet werden. Bei den verwendeten Fluoreszenzfarbstoffen handelte es sich um Propidiumiodid, Fluoresceindiacetat, Dihydrorhodamin 123, 3,3'-Dihexyloxacarbocyaniniodid und Carboxyfluoresceindiacetat Succinimidylester. Der Zusammenhang zwischen dem Verlust der Vermehrungsfähigkeit und der Zerstörung der Zellmembran sowie der Aktivität der bakteriellen Esterasen, der Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies, der Veränderung des Membranpotentials und des intrazellulären pH-Wertes der Zellen wurde bestätigt.

Abstract (eng)

The effect of heat stress on reproduction of Enterococcus faecium M-74 was studied. It could be confirmed that, the higher the temperatures applied were, the faster the number of viable bacteria was reduced. The methods used were fluorimetry and flow cytometry. By means of fluorescent dyes several vital functions of the bacterium have been investigated. The fluorescent dyes employed were propidium iodide, fluorescein diacetate, dihydrorhodamine 123, 3,3'-dihexyloxacarbocyaniniodide and carboxyfluoresceindiacetate succinimidylester. It could be shown that loss of viability of the bactieria is in connection with altered membrane integrity, activity of bacterial esterases, the production of reactive oxygen species, altered membrane potential and intracellular pH-value.

Keywords (eng)

Enterococcus faeciumprobiotic bacteriaheat stressfluorescent dyesfluorescence measurementflow cytometry

Keywords (deu)

Enterococcus faeciumprobiotische BakterienHitzestressFluoreszenzfarbstoffeFluoreszenzmessungFlowzytometrie

Subject (deu)

Naturwissenschaften in Beziehung zu anderen Fachgebieten

Subject (deu)

Mikrobiologie

Subject (deu)

Pharmazie, Pharmazeutika

Subject (deu)

Medizinische Mikrobiologie

Subject (deu)

Methoden und Techniken in den Naturwissenschaften

Type (deu)

Diplomarbeit

Persistent identifier

https://phaidra.univie.ac.at/o:1258875

URN

urn:nbn:at:at-ubw:1-29241.20813.775060-7

URI

https://utheses.univie.ac.at/detail/5198

Extent (deu)

67 S. : Ill., graph. Darst.

Number of pages

67

Association (deu)

Fakultät für Lebenswissenschaften

Title (eng)

Survey of heat stress response of Enterococcus faecium using fluorimetry and flow cytometry

Parallel title (deu)

Untersuchung der Hitzestressreaktion von Enterococcus faecium mittels Fluorimetrie und Flowzytometrie

Author

Iris Altenburger

Abstract (deu)

Die Effekte auf die Vermehrungsfähigkeit von Enterococcus faecium M-74 wurden bei fünf verschiedenen Temperaturen beobachtet. Die Ergebnisse zeigten, dass die Anzahl der lebensfähigen Bakterien umso stärker sank, je höher die Temperatur war, der sie ausgesetzt worden waren. Unter der Annahme, dass unterschiedliche Veränderungen bzw. Reaktionen in Bakterien statt finden, sobald sie mit hohen Temperaturen konfrontiert werden, wurde Enterococcus faecium M-74 unter Verwendung verschiedener Fluoreszenzfarbstoffe mittels Fluorimetrie und Flowzytometrie untersucht. Aufgrund der unterschiedlichen Eigenschaften der Fluoreszenzfarbstoffe konnten mehrere lebenswichtige Funktionen der Bakterien unter Hitzestress beobachtet werden. Bei den verwendeten Fluoreszenzfarbstoffen handelte es sich um Propidiumiodid, Fluoresceindiacetat, Dihydrorhodamin 123, 3,3'-Dihexyloxacarbocyaniniodid und Carboxyfluoresceindiacetat Succinimidylester. Der Zusammenhang zwischen dem Verlust der Vermehrungsfähigkeit und der Zerstörung der Zellmembran sowie der Aktivität der bakteriellen Esterasen, der Produktion von reaktiven Sauerstoffspezies, der Veränderung des Membranpotentials und des intrazellulären pH-Wertes der Zellen wurde bestätigt.

Abstract (eng)

The effect of heat stress on reproduction of Enterococcus faecium M-74 was studied. It could be confirmed that, the higher the temperatures applied were, the faster the number of viable bacteria was reduced. The methods used were fluorimetry and flow cytometry. By means of fluorescent dyes several vital functions of the bacterium have been investigated. The fluorescent dyes employed were propidium iodide, fluorescein diacetate, dihydrorhodamine 123, 3,3'-dihexyloxacarbocyaniniodide and carboxyfluoresceindiacetate succinimidylester. It could be shown that loss of viability of the bactieria is in connection with altered membrane integrity, activity of bacterial esterases, the production of reactive oxygen species, altered membrane potential and intracellular pH-value.

Keywords (eng)

Enterococcus faeciumprobiotic bacteriaheat stressfluorescent dyesfluorescence measurementflow cytometry

Keywords (deu)

Enterococcus faeciumprobiotische BakterienHitzestressFluoreszenzfarbstoffeFluoreszenzmessungFlowzytometrie

Subject (deu)

Naturwissenschaften in Beziehung zu anderen Fachgebieten

Subject (deu)

Mikrobiologie

Subject (deu)

Pharmazie, Pharmazeutika

Subject (deu)

Medizinische Mikrobiologie