Endophytische Mikroorganismen sind ubiquitär verbreitet und haben eine reiche biologischen Vielfalt, sie besiedeln lebende Pflanzen ohne diese zu schädigen. In jeder vaskulären Pflanze, die bis heute untersucht wurde, wurde zumindest ein Endophyt nachgewiesen. Seit der Entdeckung eines Taxol-produzierenden Endophyten in der pazifischen Eibe ist das Bestreben der Wissenschaft, endophytische Organismen zu isolieren, ungebrochen. Endophyten haben großes Potential als neuartige Wirkstofflieferanten für medizinische, landwirtschaftliche und industrielle Zwecke. Fünf Individuen von Leontopdium nivale subsp. alpinum wurden auf dem Raxplateau, dem natürlichen Vorkommen dieser traditionell medizinisch genutzten Pflanze gesammelt. Im Focus dieses Projektes stand die Etablierung eines Sterilisationsprotokolls, das sowohl für die pflanzliche Gewebekultur als auch für die Isolation von Endophyten verwendet werden kann. Weiters wurde ein Mazerationsprotokoll für drei unterschiedliche Pflanzengeweben von Edelweiß, im speziellen für Blätter, Rhizome und Wurzeln, angefertigt. Sechs verschiedene Selektivnährböden, drei wurden zusätzlich mit Antibiotika versetzt, wurden für die Isolation endophytischer Mikroorganismen verwendet. Die isolierten Endophyten wurden kultiviert und es wurde begonnen die genomische DNA mittels „Aufkoch“-Methode zu extrahieren. Die 16S-rDNA wurde vervielfältigt und mit der Didesoxymethode nach Sanger sequenziert. Neben der Isolierung der Endophyten stand die Etablierung der pflanzlichen Gewebekultur der Rossetten, als auch die Etablierung einer Kalluskultur der Blätter von Leontopodium nivale subsp. alpinum im Fokus. In zukünftigen Projekten sollen die endophytischen Mikroorganismen als Elizitoren zur Erhöhung der Sekundärmetabolite in pflanzlichen Suspensionskulturen getestet werden.

Endophytic microorganisms are rich in biodiversity and reside inside the living plants without causing any harm to the host. In every vascular plant species studied to date at least one endophyte could be found. Since the discovery of a Taxol-producing endophyte, the worldwide scientific effort on isolating endophytic microorganisms as novel source of natural products for medicinal, agricultural and industrial applications is ever growing. In the current work, five individuals of the traditional medicinal plant Leontopodium nivale subsp. alpinum were collected form the native alpine region Rax. A surface sterilization protocol for plant in vitro cultivation as well as for endophyte isolation was established. Furthermore, a maceration protocol was developed for three different tissue types of Edelweiss, specifically leaves, rhizomes and roots. Six selective media, three of them supplemented with antibiotics for additional selective pressure, were used for the isolation of microorganisms. Isolated endophytic bacteria were cultivated, and the genomic DNA from some endophytes were extracted using the boiling method. 16S-rDNA gene fragments were amplified from these DNAs, sequenced by Sanger sequencing method and subjected to phylogenetic analysis. The second focus in this study was the establishment of a tissue culture of rosettes and the callus induction of leaves from Leontopodium nivale subsp. alpinum. In future projects, endophytic microorganisms as elicitors will be tested for the enhancement of the production of bioactive compounds in plant cell suspension cultures.